多肽裂解仪是分析多肽序列和结构的关键设备，其正确使用过程涉及样品制备、仪器参数设置、数据采集与解析等多个环节。以下是详细的操作流程及注意事项：
1. 样品制备要求
纯度控制：确保多肽样品纯度＞95%，避免杂质干扰信号。若为混合物，需先进行分离纯化（如反相色谱法）。
溶剂选择：推荐使用挥发性缓冲液，避免非挥发性盐类残留导致离子源污染。对于难溶样本，可加入少量有机溶剂助溶。
浓度优化：调至理想进样浓度范围，过低会导致信号弱，过高则可能引起离子抑制效应。可通过预实验梯度稀释确定最佳浓度。
还原烷基化处理：若样品含二硫键，需用DTT或TCEP还原，再用碘乙酰胺烷基化以防止复性。
2. 标准品配置（定量分析时必需）
配制系列浓度梯度的标准曲线溶液，用于绝对定量方法的开发与验证。注意避光保存并标注失效日期。
二、多肽裂解仪仪器开机与初始化
1. 启动顺序
依次打开氮气发生器→质谱主机电源→计算机控制系统→真空系统（涡轮分子泵需预热三十分钟达到稳定转速）。
关键指标监控：待真空度降且分子泵运行平稳后方可继续操作。
2. 离子源调试
ESI源参数优化：毛细管电压设为3.5kV左右，干燥气流速调整，鞘气流辅助脱溶剂。通过观察实时总离子流图（TIC）判断喷雾稳定性——理想的锥孔电压应产生连续稳定的Taylor锥形态。
纳升喷雾模式适用场景：当样本量极少时采用纳喷针，此时需精细调节注射泵流速。
