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多肽合成仪的合成工艺

点击次数:37发布时间:2022-07-19
   多肽合成包括标准化学多肽合成、多肽修饰、多肽文库及重组多肽表达。序贯固相多肽合成可合成5-50aa的多肽,对于大于200aa的多肽,通过片段浓缩及连接技术合成。多肽合成仪顾名思义是用于合成多肽的装置。由于多肽合成工艺繁琐费时,有需求自然有研发生产,这才有了多肽合成仪。

  多肽合成仪以固相合成为反应原理,在密闭防爆玻璃反应器中按已知顺序〔序列,一般为C端羧基末端至N端氨基末端〕不断添加、反应、合成、操作最终得到多肽载体。
 
  多肽合成仪的合成工艺
  1、树脂选择与氨基酸固定
  合成多肽所用高分子载体主要为三种:交联聚苯乙烯;聚酰胺;聚乙二醇脂质树脂。氨基酸的固定主要通过被保护氨基酸的羧基与树脂的反应基团之间形成共价键来实现。
  2、氨基、羧基、侧链保护与清除
  要成功合成具有特定氨基酸序列的多肽,必须保护不参与酰胺键形成的氨基和羧基,同时也保护氨基酸侧链的活性基团,反应结束后去除保护基团。
  近年来,FMOC合成法得到广泛应用。羧基通常由形成酯基的方法保护,甲酯和乙酯是逐步合成保护羧基的常用方法。
  3、缩氨酸化反应
  固相中的肽形成反应通常是将2个对应的氨基被保护的氨基酸和羧基被保护的氨基酸放入溶液中也不形成肽键,为了形成酰胺键,将羧基活化,混合酸酐、活性酯、酰氯
  4、裂解及合成肽链纯化
  BOC法采用TFAHF裂解和脱侧链保护基,FMOC法直接采用TFA,有时也采用其他碱、光降解、氟离子和析氢等脱保护方法。合成肽链的进一步纯化、分离和纯化通常采用GX液相色谱、亲和色谱、毛细管电泳等。

多肽合成仪

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